Зміст
- Якими методами визначають якісні показники?
- Способи кількісної оцінки вірусного навантаження
- Значення концентрації вірусу
- Як проводиться трактування результатів досліджень?
- Можливі помилки у висновку з аналізу?
- Хто повинен профілактично обстежитися на вірусне навантаження?
- Чи потрібна спеціальна підготовка перед проведенням дослідження на віруси?
Сучасна діагностика гепатитів вимагає не тільки виявлення причини, але і визначення стадії хвороби, інтенсивності ураження печінки. Це необхідно для вибору оптимального варіанту лікування, прогнозу життя пацієнта.
Вірусне навантаження при гепатиті с — один З найбільш інформативних способів вирішення проблеми і відповіді на запитання лікаря. Він заснований на якісному і кількісному аналізі складу рибонуклеїнових кислот (РНК) вірусу в крові хворого людини. За отриманими показниками можна з достовірністю судити про швидкість прогресування патології печінки.
Якими методами визначають якісні показники?
Діагностика вірусного гепатиту С проводиться за спеціальним чутливих тестів. Якісний аналіз підтверджує або заперечує наявність вірусу в клітинах крові хворого. Результат дається у формі (+) або (-), «так» або «ні». Вказує на захворювання навіть в ранній стадії, але не дає можливості встановити інтенсивність розвитку ураження печінки, «силу» вірусу.
Для проведення досить спеціального експрес-тесту і краплі крові. Він дозволяє виявити антитіла до вірусу. Можна придбати в аптеці. Складається з комплекту пластикової смужки, піпетки і голчастого пристосування для проколу пальця. Кров забирається піпеткою і поміщається в зазначений відсік.
Результат отримують через 10-15 хвилин. Поява двох смужок говорить «так», однієї — «ні». Буває видно ще одне слабо забарвлена пляма. Його можна розцінити як низьку концентрацію антитіл.
Після отримання позитивної відповіді пацієнт повинен обов’язково проходити обстеження для встановлення точного діагнозу.
Вірусологічні тести дають можливість вивчення циклічної активності впливу на печінку
Якісні порушення в організмі при гепатиті С підтверджуються клініко-біохімічними дослідженнями. Про високого ступеня ураження печінкових клітин і порушених функцій органу говорять наступні результати:
- зростання ШОЕ, гемоглобіну;
- виявлення уробіліну і білірубіну в сечі;
- збільшені в рази трансферази (аланиновая і аспарагінова);
- зниження протромбінового індексу та альбумінів;
- зростання фруктозо-1-фосфатальдолазы Ф-1-ФА, тимолової проби; значне підвищення в сироватці холестерину, тригліцеридів, білірубіну.
Підтвердженням порушених функцій печінки є ферменти:
- лужна фосфатаза;
- сорбитдегидрогеназа;
- лактатдегидрогиназа;
- гаммаглутаминтранспептидаза;
- гаммаглутамилтрансфераза.
Їх вивчають у біохімічних лабораторіях поліклініки. Різке відхилення складу вимагають додаткових кількісних аналізів на вірусне навантаження.
Способи кількісної оцінки вірусного навантаження
Вірус гепатиту С на відміну від інших має безліч штамів (генотипів). Виділено понад 9 різновидів, крім того, кожен ще підрозділяється на 3-4 підтипу. Це надає вірусу можливість мутувати.
Весь генетичний матеріал укладено в РНК і знаходиться в ядерних структурах клітини мікроорганізму. Кількісний метод використовується при виявленому безспірному діагнозі, коли необхідно встановити форму хвороби і стадію запального процесу.
Підрахунок проводиться по кількості клітин вірусу в 1 мл крові пацієнта. Чим більше РНК вірусу гепатиту С, тим вище активність поразки. Це вказує на загрозу прогресування хвороби, поширення на здорові клітини печінки. Якщо чисельність клітин ненабагато вище норми, то результат все одно вважається вірусним навантаженням.
Для визначення кількості РНК у «хворих» клітинах застосовують імунологічні методи. Вони полягають у виявленні специфічних антитіл або, навпаки, антигенів при впливі відомим реактивом.
Для аналізу застосовуються стандартні набори реактивів
У методиці імуноферментного аналізу (ІФА) в сироватку пацієнта вводять стандартні антитіла, мічені ферментами. Якщо в крові є антигенні структури вірусу гепатиту С, то комплекси антиген+антитіло змінюють колір барвника. Кількісний підрахунок заснований на пропорційній відповідності молекул антигену.
Спосіб імуноблотінгу — більш чутливий, поєднує ІФА і попереднє розділення плазми електрофорезом. Дозволяє виявити маркери гепатиту С (антитіла і імуноглобуліни). Для дослідження використовують РНК-блоттінг, білок-блоттінг. Час проведення аналізу від трьох годин до двох діб.
Радіоімунологічних аналіз (РІА) — відрізняється використанням мічених ізотопів для кількісної оцінки компонентів реакції. Подальша радіометрія видає остаточну цифру. Метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) — не є імунологічним. Його значимість важко переоцінити.
Справа в тому, що навіть при дуже малому вмісті специфічної генної інформації з РНК проводиться тиражування (копіювання) ланцюга амінокислот, що збільшує загальну масу субстрату. Тому дослідження геному вважається найбільш достовірним. Показує позитивний результат при зараженні вже на п’ятий день, задовго до появи клінічної симптоматики. У здорової людини результат буде негативним.
Діагностика гепатиту С
Одна з рекомендацій ВООЗ — триразове дослідження методом ПЛР для виявлення РНК вірусу гепатиту С. Аналіз називається «тест 321».
Експерти зробили висновок, що тільки триразове підтвердження вірусного навантаження не менше 60 МО/мл вважається достовірним діагностичним ознакою навіть на тлі відсутності інших маркерів.
Зазвичай кров на ПЛР під час гепатиту С здають в перший раз до лікування, потім після першої, четвертої, дванадцятої і двадцять четвертого тижня. Дослідження після трьох місяців лікування (12 тижнів) вважається показником ефективності застосованих препаратів.
Метод роздвоєною ДНК(R-DNK). Вважається більш дешевим, але менш результативним. Підходить для державних медичних установ. Дозволяє проводити дослідження відразу великих колективів людей. Здатний видати негативний результат при наявності вірусу. Більш раціонально цей метод рекомендується використовувати у якості додаткового обстеження.
Спосіб транскрипционной ампліфікації (ТМА). Найбільш простий і дешевий при достатній ефективності. Підходить для діагностики гепатиту С. Критерієм патології та ступінь заразності хворого при R-DNK вважається рівень вище 500 ME, при TMA — від 5 до 10 МО.
Значення концентрації вірусу
Чим більше вміст вірусу в крові людини, тим він небезпечніший для оточуючих своєю здатністью заражати. Ефективність лікування залежить від того, як вдається знизити кількість вірусу. Цей критерій враховується для прогнозу одужання.
Комбінацію лікарських засобів підбирають для максимального впливу на вірус
При високому вірусному навантаженні протягом тривалого часу виникає ризик ураження не тільки печінки, але і всього організму, підвищується вірогідність ускладнень.
Зміст збудника перевіряють в динаміці. Якщо вдається зменшити вірусне навантаження, то медикаменти вважаються ефективними, можна переводити хворого на підтримуючі дози. При негативній динаміці аналізу необхідне коригування дози чи заміна препаратів. Загальну оцінку стану пацієнта дає одночасне зіставлення з результатами клінічних і біохімічних тестів.
Для першого дослідження необхідний тижневий термін. Динаміка повторних аналізів проводиться через місяць. При позитивному аналізі на антитіла у людей без симптомів хвороби необхідно повторювати дослідження вірусного навантаження щорічно.
Як проводиться трактування результатів досліджень?
За підсумками видаються загальні якісні результати (негативний або позитивний). При виявленні вірусу докладно вказується кількісне значення з характеристикою ступеня зараженості.
Розшифрування вірусного навантаження при гепатиті С проводиться в міжнародних одиницях (МО/мл):
- високим вважається показник — понад 800 000 МО/мл;
- низьким вірусним навантаженням — менше 800 000.
Одночасно враховується в першому випадку більше 2 млн копій/мл, у другому — менше. При високому навантаженні говорять про активному запальному процесі. В таблиці вказана більш детальна трактування ступеня навантаження.
Найбільш часте значення при первинному дослідженні на тлі ознак гепатиту — приблизно 1 100 000 МО/мл Результат вважається позитивним. Призначається на весь комплекс терапії. Якщо виявляють від 400 000 МО і більше, вважається, що вірус не просто присутній, але і активно розмножується, заражаючи оточуючих. Невелике зниження — показник сприятливого прогнозу на одужання.
Негативний результат і ефективне лікування підтверджуються повною відсутністю генного матеріалу РНК вірусу гепатиту С в крові. Його вважають достовірним при повторах з великими перервами. Збільшення вірусного навантаження після закінчення курсу лікування і хороших показників вказує на ймовірність рецидиву гепатиту.
Якщо у висновку написано: «РНК нижче діапазону вимірювань», це означає, що генетичний матеріал вірусу є, але занадто малий для визначення конкретної кількості даним методом. Підтвердити аналіз або спростувати можна тільки за допомогою методу полімеразної ланцюгової реакції.
При виявленні позитивного аналізу на гепатит С у вагітної жінки з підвищеною вірусним навантаженням значно підвищується ризик зараження плода від хворої матері. Доводиться вирішувати питання про доцільність збереження вагітності, оскільки застосування лікарських препаратів для лікування може викликати важкі генні мутації у дитини.
Не слід намагатися трактувати результати самостійно, для цього є підготовлені фахівці
Можливі помилки у висновку з аналізу?
При різких коливаннях значень лікар розшифровує аналіз і не виключає можливість помилки. Вона пов’язана:
- з неправильним зберіганням матеріалу для дослідження (крові) після забору на аналіз;
- наявністю в крові пацієнта хімічних сполук ліків, Гепарину, рідин з високим вмістом білків;
- помилкою медичного працівника (лаборанта).
Зазвичай лікарі намагаються направляти на аналізи в одну і ту ж лабораторію. Повторне дослідження дозволяє більш уважно перевірити результат.
Хто повинен профілактично обстежитися на вірусне навантаження?
Серед населення виділяється група ризику. Це люди, які мають велику ймовірність зараження гепатитом С. Їм пропонується проходити обов’язкове обстеження щорічно. Рекомендації стосуються:
- медичних працівників інфекційних кабінетів, відділень;
- родичів і контактують з хворими;
- Бомжів та наркоманів;
- перенесли різні форми гепатиту;
- людей, що ведуть статеве життя з частими змінами малознайомих партнерів, що використовують незахищений секс;
- шанувальників татуажу, пірсингу;
- пацієнтів після хірургічного втручання, переливання крові;
- дітей, народжених від хворих матерів;
- хворих із захворюваннями печінки неясного генезу.
Деякі лікарі вважають обов’язковим обстеження осіб при частому лікування у стоматолога, а також жінок в післяпологовому періоді, якщо їм переливалася кров.
Виявлення зараження вірусним гепатитом вагітної жінки ставить майбутніх батьків перед проблемою необхідності переривання
Чи потрібна спеціальна підготовка перед проведенням дослідження на віруси?
Для аналізу проводиться забір крові з вени. Щоб бути впевненими в достовірності результатів рекомендується дотримувати наступні вимоги. Здавати аналіз вранці, натщесерце, якщо лабораторія працює цілодобово, слід передбачити перерву в прийомі їжі не менше восьми годин.
Не рекомендується пити перед забором крові на гепатит С чай, сік, кава, можна вживати воду. За дві доби потрібно відмовитися від алкоголю, жирних і смажених страв. За годину — не можна палити. Перед дослідженням заборонені будь-які фізіотерапевтичні процедури, масаж, ультразвукове і рентгенівське обстеження.
24 години не можна приймати лікарські засоби. В останній день не варто планувати спортивні тренування, важку фізичну роботу, емоційні навантаження. Перед входом в лабораторію рекомендується посидіти спокійно 15 хвилин.
Застосування сучасних противірусних засобів дозволяє успішно лікувати вірусний гепатит С. Та для контролю за терапією, діагностикою стану печінки та активності запалення необхідні методи вірусологічного дослідження. Мета сучасних розробок — впровадження простих недорогих, але достовірних експрес-методик для масового обстеження.
