Гастрит        05 Червня 2018        350         0

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз крові

Зміст

  • Методи діагностики гельмінтозів
  • Додаткові способи
  • Серологічні методи
  • Інструментальні методи
  • Відео по темі

Гельмінтози та протозоозы завдають значної шкоди здоров’ю людини. Захворювання може проявлятися абдомінальним, алергічних, анемічним синдромом, хронічним токсикозом, глисти і найпростіші можуть уражати тканини печінки, легенів, жовчовивідних шляхів, головного мозку, очі.

Гельмінтози не мають специфічних симптомів, тому присутність паразита можна підтвердити тільки лабораторними та інструментальними методами. Діагностика гельмінтозів може включати гельминтоовоскопию, гельминтоларвоскопию, серологічні методи, а також рентген, ендоскопію, УЗД.

Методи діагностики гельмінтозів

Дослідження на гельмінтози призначається при появі характерних клінічних симптомів і на підставі епідеміологічного анамнезу (утримання в будинку тварин, відвідування заражених місць, можливе вживання зараженого м’яса або води). Лабораторна діагностика гельмінтозів може проводитися протягом декількох годин або днів, що залежить від виду паразита, який імовірно провокує виникнення симптомів.

Паразитологічні методи можуть бути прямими, тобто полягають у виявленні паразита, його фрагмента або личинки, або ж застосовуються імунологічні методи, які дозволяють виявити гельмінта в личинкової стадії розвитку, у фазі міграції, при паразитуванні тільки самця, несильним інвазії, а також якщо у хробака згасла або ще не розвинулася репродуктивна функція.

Дослідження випорожнень

У діагностиці гельмінтів велике значення має копрологічне дослідження, оскільки більшість глистів паразитують у кишечнику, а їх яйця виділяються разом з калом. Калові маси досліджують макроскопічним і мікроскопічним способом.

З допомогою макроскопічних методу у фекаліях виявляють гельмінтів або їх частини. У чашці Петрі або невеликий плоскій ємності кал змішують з водою і розглядають через лупу. При достатній кількості світла на темному тлі вдається виявити білі фрагменти глиста. Всі підозрілі вкраплення перекладають на предметне скло з гліцерином для подальшого розгляду під збільшенням.

Для виявлення частині гельмінта може використовуватися і метод відстоювання. Фекалії змішують з водою і дають відстоятися, після цього зливають воду. Після декількох отстаиваний, коли вода вже буде прозорою, рідину виливають, а осад розглядають в чашці Петрі. При мікроскопії випорожнень за яйця глиста можуть прийматися бульбашки повітря, рослинні клітини, спори і пилок рослин, частинки неперетравленої їжі.

У сумнівних випадках необхідно проводити повторні аналізи. Методичні вказівки (МУК), розроблені в 2013 році, встановлюють порядок застосування методу відбору проб та описують методи лабораторних досліджень біоматеріалу, що дозволяє застосовувати найбільш сучасні методи лабораторної діагностики гельмінтозів і протозоозов і коректно розшифровувати їх результати.

Мікроскопічний метод допомагає виявити личинки паразитів або їх яєць. Найбільш вживаними та доступними вважається нативний мазок, який дозволяє побачити яйця і личинки всіх глистів. Невелика кількість перемешенного калу наносять на предметне скло, намащеного гліцерином, і розглядають при невеликому збільшенні.

При невираженою інвазії яйця і личинки не завжди вдається виявити, тому використовуються методи збагачення.

Методи збагачення

У методах використовується те, що маючи різний вага личинки паразитів спливають на поверхню фізіологічного розчину або, навпаки, осідають на дно. Якщо яйця важче рідини, то вони нагромаджуються в осаді (метод седиментації дозволяє виявити яйця трематод), а якщо легше, то яйця спливають (метод флотації дозволяє побачити яйця волосоголовця, карликового ціп’яка, анкилостомид).

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз крові
Методи седиментації і флотації ефективні, оскільки вдається знайти навіть невелика кількість яєць
Метод Фюллеборга

У скляну банку поміщають 2-5 г калу і заливають фізіологічним розчином (400 грамів солі на літр води), потім розмішують і дають відстоятися. Через 45 хвилин, утворену плівку поміщають на предметне скло з гліцерином. Інший спосіб помістити плівку на скло: долити в посудину води до країв і накрити предметним склом.

У солоній воді яйця спливають і їх можна побачити у мікроскоп, але у різних гельмінтів яйця піднімаються на поверхню рідини з різною швидкістю (карликового ціп’яка через чверть години, аскарид через півтора–дві години, волосоголовця тільки через 2-3 години). Крім утворилася поверхневої плівки, обов’язково потрібно досліджувати і осад, так як яйця тениид, трематод, аскарид тонуть при даній концентрації сольового розчину.

Перевагами даного методу є його доступність, низька вартість і висока ефективність, тому його часто поєднують з нативним мазком. Серед недоліків даного способу діагностики гельмінтозу можна виділити необхідність дослідження поверхневого шару осаду, а також тривалий час для відстоювання.

Метод Калантарян

Також передбачає використання насиченого розчину натрію, але тільки меншою відносною щільністю (кілограм солі нітрату натрію на літр води), що призводить до виринання більшості яєць гельмінтів, а значить розглядати осад не потрібно.

До недоліків даного методу діагностики гельмінтозів відносять необхідність використання великої кількості солі натрію і азотистої кислоти, крім того, онкосфери тениид і яйця трематод не піднімаються на поверхню. Якщо розчин варто довше 1-2 годин, то яйця деяких глистів набухають і йдуть в осад.

Читайте також:
Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз кровіОбстеження на ентеробіоз
Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз кровіДіагностика лямбліозу

Метод Горячева

Передбачає осадження яєць. У ємність переливають розчин ізотонічний. В окремій банку фекалії змішують з водою, фільтрують через марлю, і поверх наливають сольового розчину, так щоб вийшло два шари. Через 2-3 години, шар з калом прибирають за допомогою піпетки, а другий шар залишають ще на 12-20 годин або поміщають в центрифугу.

Осад переливають на предметне скло і розглядають в мікроскоп. Даний метод був запропонований для пошуку збудника опісторхозу і виявився більш інформативним, ніж мікроскопія нативного мазка або метод Фюллеборна, однак, він майже не використовуються, оскільки технічно складний.

Метод Красильникова

Пари, які входять до складу пральних порошків, звільняють яйця глистів від калу, і тим самим сприяють випаданню їх в осадок. Десять грам миючого засобу розчиняють у літрі води. Наливають розчин у скляну банку, додають туди випорожнення і перемішують.

За добу в розчині утворюється осад з декількох шарів. На дні осідають великі частинки, у середньому шарі концентруються яйця гельмінтів, спливають вгору сіруваті пластівці. Для дослідження беруть піпеткою 2-3 краплі рідини з другого шару.

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз крові
Метод Красильникова дає можливість діагностувати будь-який вид гельмінтозу, однак, він займає багато часу
Ефір-оцтовий метод

Дає можливість виявити навіть дрібні яйця трематод, кишкових глистів і цисти найпростіших, він також використовується, щоб визначити інтенсивність інвазії. Фекалії поміщають у ємності з оцтовою кислотою і перемішують до однорідності, потім проціджують, переливають у другу пробірку і доливають ефір. Всі збовтують і поміщають в центрифугу. Утворився верхній шар знімають, а осад наносять на предметне скло і досліджують під мікроскопом.

Пошук живих личинок

Закручування по Шульману дозволяє виявити в калових масах живих личинок глистів (зокрема, стронгилоида). Для аналізу береться тільки свіжий кал. Його опускають у скляну банку з фізіологічним розчином, і розмішують круговими рухами, не доторкаючись до стінок. Яйця і личинки паразитів концентруються в центрі. Після перемішування скляною паличкою (якій заважали) роблять мазки на предметному склі.

Метод Бермана

Використовує те, що личинка рухається у напрямку до тепла. За допомогою даного діагностичного методу можна виявити сгронгилоидоз. Так, 20-50 грам фекалій кладуть на металеву сітку і ставлять її в воронку, в яку наливають теплу воду (40-50 ? С). Личинки переміщуються з калу у воду. Їх залишають відстоюватися протягом 3-4 годин. Відстояну рідину поміщають в центрифугу, а потім досліджують.

Метод Харада і Морі

Даний метод радить ВООЗ для виявлення анкилостомидоза у людей і проводиться при необхідності диференціювати анкілостомоз від некатороза. У центр фільтрованого паперу наносять півграма калу. Потім папір опускають в пробірку таким чином, що чистий кінець виявляється у воді, а верхня частина закріплюється пробкою, при цьому фекалії не стосуються води. Пробірку поміщають у термостат на 5-6 діб. За цей час филяриевидные личинки осідають і їх можна побачити через лупу.

Перевірка перианальної зіскрібка

Даний метод застосовується для виявлення яєць гостриків і бичачого ціп’яка. Він передбачає перевірку перианальної змиву або зіскрібка. Збір матеріалу проводиться вранці до акту дефекації (у дівчат та до сечовипускання) або ввечері, через 2-3 години після того, як пацієнт заснув. У дітей зразок може бути взятий після денного сну.

Для зіскрібка може використовуватися ватний тампон або паличка, а також клейка стрічка. Ватним тампоном проводять в області періанальна складок і біля ануса. Паличку з тампоном опускають у пробірку і відправляють у лабораторію. Лаборант робить мазки на предметних стеклах і микроскопирует їх.

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз крові
Метод перианальної зіскрібка широко поширений, оскільки простий у застосуванні і дозволяє зібрати матеріал для дослідження в домашніх умовах
Метод Грехема чи липкою стрічки

Також є ефективним, оскільки дозволяє діагностувати аскаридоз і виявити онкосфери тениид. Для збору матеріалу використовується прозора клейка стрічка довжиною 4-5 див Її липкою стороною доторкаються до перианальным складкам, швидко знімають і клеять на предметне скло. Перевага методу в тому, що можна довго зберігати зразок.

Додаткові способи

Лабораторна діагностика гельмінтозів може включати:

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз кровіДіагностика аскаридозу

  • дослідження вмісту кишечника. Личинки і яйця глистів, що заселяють печінка, жовчний міхур, підшлункову залозу та дванадцятипалу кишку, можна розгледіти в жовчі та вміст кишечника. Зразки для дослідження беруть під час дуоденального зондування. За допомогою отриманих матеріалів можна діагностувати опісторхоз, фасціольоз, клонорхоз, дикроцелиоз, анкілостомідозі, стронгилоидозы;
  • дослідження сечі. Метод дозволяє виявити яйця шистосом. Для проведення тесту необхідно 50 мл сечі, зібраної в середині дня, перелити в конічну склянку і дати відстоятися півгодини. Потім сечу зливають, а осад поміщають в центрифугу;
  • дослідження мокротиння. При розгляданні зразка мокротиння через мікроскоп можна побачити яйця легеневого сосальщика (парагонима), личинки аскариди, некатора і стронгилоида, фрагменти эхинококкового міхура;
  • дослідження крові. При фарбуванні біоматеріалу по Романовському можна виявити личинки нематод, які паразитують в підшкірній клітковині. Кров потрібно брати і в нічний час, оскільки личинки при деяких тропічних филяриозах помітні, тільки коли людина відпочиває. Аналіз крові на гельмінтози інформативний ще й тому що показує знижене кількість еозинофілів, що побічно вказує на присутність в організмі черв’яків.

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз крові
Дослідження сечі дозволяє виявити хробака, що викликає сечостатевої bilharzia

Серологічні методи

Імунологічне дослідження проводиться при підозрі на тяжкі тканинні гельмінтози та трематодозы. За допомогою ІФА виявляють ехінококоз, трихінельоз, альвеококоз, токсокароз, цистицеркоз, опісторхоз, фасціольоз, клонорхоз. При гельмінтозі в крові підвищується спочатку рівень титру IgM, а потім і титр IgG, що вказує на активну інфікування.

Диференціальна діагностика гельмінтозів IgG (кац), ефективна не тільки при виявленні аскарид, але і для виявлення протозоозов (найпростіших), які в тій же мірі здатні нашкодити організму. Метод реакції непрямої гемаглютинації (РНГА) дозволяє виявити опісторхоз, ехінококоз, альвеококоз, трихінельоз.

Ехінококоз і альвеококоз також можна виявити при використанні реакції латекс-аглютинації (РЛА), а цистицеркоз та трихінельоз підтвердить реакція кольцепреципитации (РПК). Ці методи застосовуються в тому випадку, якщо іншими, більш простими способами не вдається довести присутність глиста в організмі.

Серологічні результати не означають, що гельмінт знаходиться в крові, а лише вказують, що на нього виробилися антитіла.

Інструментальні методи

Для виявлення деяких гельмінтозів у людини, що вражають окремі органи, проводяться інструментальні дослідження:

  • рентген;
  • УЗД;
  • комп’ютерна томографія;
  • магнітно-резонансна томографія;
  • ендоскопія.

Дані методи діагностики можуть застосовуватись і для оцінки тяжкості ураження гельмінтами внутрішніх органів. У рідкісних випадках вдається побачити самих хробаків, частіше дослідження проводиться для виявлення неспецифічних ознак зараження (збільшення ураженого органу, порушення скорочення жовчного міхура, поява кіст).

Дослідження на гельмінтози: лабораторна та диференціальна діагностика у людини, як здавати аналіз крові
За допомогою лабораторної діагностики гельмінтозів вдається виявити самих паразитів їх фрагменти, яйця або личинки, що дозволяє встановити точний діагноз і призначити адекватне лікування

Аналіз крові на гельмінтози є менш інформативним, оскільки вказує лише на розвиток імунної відповіді організму, а це значить, що інвазія була, але коли саме-не відомо.

Як здавати аналіз на визначення того чи іншого виду гельмінта, підкаже лікуючий лікар.

Як правило, спеціальної підготовки не потрібно (венозна кров здається натщесерце, матеріал для дослідження калу береться з трьох різний місць і зберігається не довше 8 годин). Якщо у випорожненнях не виявлені глисти, то це не говорить про те, що вони відсутні в кишечнику і, швидше за все, будуть проведені повторні аналізи калу.