Гастрит        05 Червня 2018        343         0

Діагностика ботулізму (лабораторна, мікробіологічна): як визначити захворювання, аналізи

Зміст

  • Що дозволяє запідозрити розвиток ботулізму
  • Як підтверджується діагноз
  • Лабораторні методи
  • Відео по темі

Ботулізм розвивається із-за попадання в організм ботулотоксину, який відноситься до одного з найбільш отруйних біологічних речовин. Виділяється токсин в процесі життєдіяльності спорообразующей палички, розмножується в безповітряного середовищі.

Потрапляє інфекція в організм людини при вживанні консервів домашнього приготування, оскільки отрута тривалий час існує в розсолах, консервах та харчових продуктах, що містять різні спеції. Харчова токсикоінфекція вражає нервову систему, що може призвести до зупинки дихання або серцебиття, тому кожен, хто любить домашні консерви, повинен знати, як визначити ботулізм.

Що дозволяє запідозрити розвиток ботулізму

Діагностика ботулізму починається з вивчення епідеміологічного анамнезу і клінічної картини захворювання. Інфекція передається фекально-оральним шляхом, тобто разом з продуктами харчування, недостатньо отчищенными від грунту. У переважній більшості випадків, причиною хвороби виступає вживання приготованих в домашніх умовах консервованих продуктів, які були забруднені спорами клостридій.

Токсин може перебувати в банках з огірками, помідорами, грибами та іншими продуктами, що містять розсіл. Необхідною умовою для розмноження бактерії є відсутність кисню, тому вони накопичуються тільки в щільно закритих банках. Якщо хворий їв протягом останніх 10 днів консервовані овочі, гриби, м’ясні вироби або солону рибу, то є ймовірність, що він заразився токсикоинфекцией.

Люди высоковосприимчивы до ботулотоксину, а значить, навіть незначні його дози можуть призводити до появи клінічних симптомів. Ускладнює діагностику ботулізму те, що не всі, хто їв продукти з банки, заражаються, оскільки токсин концентрується в певному місці і досить мінімального кількості, щоб розвинулася патологія.

Разом з тим часто бувають випадки сімейного ураження ботулізм після вживання довго зберігалися консервованих продуктів. У рідкісних випадках зараження ботулотоксином відбувається при контакті обсемененной рідини з ранами і гнійниками, розвивається так званий раневый ботулізм. Тому не можна навіть відкривати підозрілу банку з консервами.

Діагностика ботулізму (лабораторна, мікробіологічна): як визначити захворювання, аналізи
Проявляється ботулізм найчастіше протягом 4-6 годин, але є випадки, коли інкубаційний період затягувався на тиждень або 10 днів

Симптоми ботулізму

Токсин на початку захворювання може спровокувати розвиток гастроентерологічного, очного синдрому або гостру дихальну недостатність. Найчастіше розвивається гастроентерологічний варіант, який протікає, як харчова токсикоінфекція. Хворий відчуває біль у верхній частині живота, з’являється нудота, блювота, діарея, шкіра швидко стає сухою з-за втрати рідини, нерідко хворі говорять про те, що стало боляче ковтати.

У продромальний період ботулізму, що протікає по очному варіанту, хворі скаржаться на порушення зору (поява чорних крапок, затуманення, втрата чіткості і гостроти зору, розвиток гострої далекозорості). Навіть на початковому етапі хвороби може виникнути гостра дихальна недостатність, яка здатна приводити до летального результату протягом 3-4 годин, тому якщо раптово з’явилася і збільшується задишка, шкіра і слизова оболонка стають синюшними, то терміново необхідна медична допомога.

У розпал хвороби з’являються специфічні для ботулізму симптоми: парези і паралічі м’язів різних груп. У хворих виникає офтальмоплегія (параліч м’язів очей), що може проявлятися розширенням зіниць, косоокістю, вертикальним ністагмом, опущенням століття.

З-за парезу м’язів глотки розвивається дисфагія (порушення ковтання), що призводить до неможливості проковтування їжі і рідини. Ботулотоксин провокує і ослаблення іннервації мімічних м’язів, що проявляється в асиметрії особи. Хода хворих нестійка, відзначається загальна слабкість. Парез м’язів кишечника призводить до розвитку запору.

Послідовно порушується мова. Спочатку у хворого змінюється голос із-за сухості слизової оболонки голосових зв’язок. Коли розвивається парез м’язів мови, людина не може виразно говорити. По мірі прогресування хвороби виникає парез м’язів піднебінної фіранки, що робить голос гугнявим, а коли слабшають голосові зв’язки, голос зникає зовсім.

Із-за порушення іннервації м’язів гортані неможливий повноцінний кашльовий поштовх, тому хворі можуть задихнутися, якщо поперхнутся.

Діагностика ботулізму (лабораторна, мікробіологічна): як визначити захворювання, аналізи
Як правило, ботулізм не викликає підвищення температури тіла (рідко виникає субфебрилітет) або втрату свідомості

Таким чином, запідозрити розвиток ботулізму можна, якщо хворий недавно вживав консервовані продукти, а симптоми вказують на порушення іннервації різних груп м’язів (очних, особових, голосових). При підозрі на ботулізм необхідно терміново звернутися до лікаря. Фахівці проведуть диференціальну діагностику, а з допомогою мікробіології буде підтверджено або спростовано присутність отрути в організмі.

Як підтверджується діагноз

Диференціальна діагностика проводиться на початковому етапі захворювання, коли клінічна картина ще не включає специфічні симптоми ботулізму. Перші ознаки хвороби, такі як діарея, блювання, нудота, слабкість характерні для багатьох кишкових інфекційних захворювань і харчових отруєнь.

Параліч очних м’язів може виникнути в результаті новоутворення, отруєння свинцем, алкоголем, барбітуратами, ураження головного мозку (ЧМТ, інсульт, енцефаліт), зараження правцем, дифтерією та іншими інфекційними хворобами. Дихальна недостатність розвивається при захворюваннях бронхолегеневої системи і ураженнях ЦНС.

Діагностика ботулізму (лабораторна, мікробіологічна): як визначити захворювання, аналізиЯкі продукти викликають ботулізм?

Диф. діагностика ботулізму вимагає виключення:

  • міастенії;
  • вірусного енцефаліту;
  • дерматоміозиту;
  • синдрому Гійєна-Барі;
  • синдром Верніке;
  • поліомієліту;
  • отруєння грибами або атропіном.

Лабораторні методи

Специфічна лабораторна діагностика ботулізму на початковій стадії хвороби не розроблено, тому дифдиагностика ґрунтується на даних епідеміологічного анамнезу (вживання консервованих продуктів, алкоголю, отримання черепно-мозкової травми).

По мірі розвитку ботулізму з’являються характерні симптоми, які і допомагають диференціювати хвороба (збереження свідомості та чутливості, відсутність спека і лихоманки, м’язові паралічі). Подальша діагностика проводиться для визначення типу токсину (А, В, С, Е, F) та підтвердження діагнозу. При підозрі на ботулізм у хворого беруть аналіз крові і сечі, і хоча дослідження не є специфічними, але вони допомагають встановити тяжкість перебігу хвороби.

Діагностика ботулізму (лабораторна, мікробіологічна): як визначити захворювання, аналізи
На інтоксикацію вказує підвищення кількості лейкоцитів і швидкості осідання еритроцитів

Мікробіологічна діагностика ботулізму дозволяє виявити токсин в блювотних масах, калі, крові, сечі, промивних водах шлунка, залишки продуктів. Для визначення виду отрути використовують бактеріологічний і біологічний метод, а також встановлюють фагоцитарний показник.

При використанні бактеріологічного методу взятий матеріал змішують у стерильній ємності з фізіологічним розчином хлориду натрію. Потім висівають матеріал на живильне середовище в чотири пробірки. Два зразки нагрівають при температурі 60 ? С протягом 15 хвилин, що дозволить виявити бактерію типу Е.

А інші дві пробірки нагрівають 20 хвилин при 80 ?С. Розмножуються бактерії типу Е і F при 28 ? С, а типу А, В, С за 35 ?С за 48 годин. Через 1-2 доби оцінюють характер росту і проводять фарбування мазків за Грамом. Після виділення чистої культури вивчають її антигенні властивості з допомогою реакції аглютинації з типовими сироватками.

Біологічний метод передбачає визначення типу токсину за допомогою реакції нейтралізації, що важливо для специфічного лікування. Для виявлення реакції нейтралізації застосовують сухі діагностичні антитоксичні сироватки, які змішують з фізіологічним розчином. Якщо сироватка діє, то в досліджуваній пробі токсин нейтралізується.

Матеріал для дослідження поміщають в 6 пробірок, в п’ять з них додають протиботулінічні сироватки типу А, В, С, Е, F, а в шосту нормальну сироватку. Пробірки опускають в термостат на 30 хвилин, а потім вводять по 1 мл рідини білим мишам. Гризуни, яким була введена відповідна протиботулінічна сироватка, не гинуть.

Діагностика ботулізму (лабораторна, мікробіологічна): як визначити захворювання, аналізи
Лабораторна діагностика калу при виявленні ботулізму не завжди дає точний результат, оскільки вегетативні форми клостридії можуть виявлятися і в кишечнику здорової людини

Ботулінічний токсин знижує фагоцитарну активність лейкоцитів. Для виявлення цієї властивості кров передбачуваного хворого змішують з цитратом натрію, в пробірки додають полівалентний або типову сироватку і поміщають в термостат на півгодини, для знищення токсину. Потім досліджуваний матеріал вводить стафілокок і знову опускають в термостат на 20 хвилин для завершення фагоцитозу.

Роблять мазок з кожного зразка і підраховують кількість стафілококів, захоплених у середньому одним лейкоцитом. Якщо в крові був присутній ботулінічний токсин, то фагоцитарний показник низький. Якщо ж додавалася типова сироватка в пробірки, то там, де сироватка відповідала токсину, відбудеться нейтралізація і фагоцитарний показник буде істотно вище.

У розпал захворювання можна виявити токсин в крові за допомогою РОПГА з антительным еритроцитарних диагносикумом. Справа в тому, що еритроцити сенсибилизируются специфічними антитілами і склеювання відбувається, якщо в зразку матеріалу присутні антигени. Тест дозволяє виявити навіть мінімальна кількість токсину в досліджуваному матеріалі, оскільки володіє високою чутливістю і специфічністю.

В кров, узяту з вени, додають антитіла, які позначені ферментами. На них реагують бактеріальні антигени і утворюють з ними імунні комплекси, що викликає зміну кольору матеріалу. Фахівці по інтенсивності забарвлення роблять висновок про присутність у зразку специфічних антитіл до ботулистическому токсину.

Метод дот-иммуноанализа дозволяє розпізнати ботулізм вже через три години після отримання для дослідження матеріалу. За допомогою тесту можна перевірити на токсини не тільки кров, але і продукти харчування, які ймовірно стали джерелом інфекції.

На нітроцелюлозний мембранний фільтр, на якому знаходяться мічені противоботулиническе антитіла, наноситься досліджуваний матеріал. Після цього, фільтр обробляють спеціальним складом, який темніє, якщо в рідинах присутній токсин. Концентрація отрути визначається при порівнянні з контрольною школою.

Лабораторна діагностика ботулізму підтвердить або спростує захворювання, що необхідно для призначення адекватного лікування, яке полягає в прийомі протівоботулініческой сироватки. На сьогоднішній день не складає труднощів визначити присутність в крові ботулотоксину, але захворювання розвивається стрімко, тому необхідно знати, як розпізнати хворобу, щоб вчасно звернутися до лікаря.