Гастрит        28 Лютого 2018        243         0

Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати

Зміст

  • Які види дослідження на хелікобактер пілорі проводяться для діагностики?
  • Підтвердження наявності хелікобактерії за аналізом крові
  • Як виявляється хелікобактер пілорі в калових масах?
  • Уреазний дихальний тест
  • Метод біопсії з цитологічним дослідженням
  • Потрібна підготовка перед здачею аналізу?
  • Кому необхідно пройти обстеження?

Враховуючи масивну ураженість населення хелікобактер, її роль у патогенезі захворювань шлунка з подальшим переходом в ракову пухлину, дуже важливо перевірити людей з груп ризику на наявність хелікобактер пілорі. Це ж стосується пацієнтів із вже діагностованим захворюванням. У них визначення хелікобактер дає можливість дізнатися причину хвороби, провести специфічне лікування і проконтролювати його результативність.

Як виявити інфекційний збудник, який:

  • не росте на звичайних поживних середовищах;
  • місцем проживання «вибрав» шлунковий сік з достатньою кислотністю;
  • чудово пересувається у гелеподібній слизу завдяки своїм жгутикам і спіралеподібною формою;
  • при небезпечній для себе ситуації покривається захисною плівкою і приймає кулясту форму.

Виявилося, ця задача розв’язана. Особливістю більшості видів аналізів на хелікобактер є виявлення не самого збудника, а типових змін в організмі, які він викликає.

Які види дослідження на хелікобактер пілорі проводяться для діагностики?

На сьогодні існує кілька способів як виявити хелікобактер пілорі в організмі людини. Оптимальний метод підкаже лікуючий лікар. Вибір залежить від можливостей лабораторії, стану пацієнта, віку, мети дослідження.

Зазвичай призначають:

  • аналіз крові на визначення наявності антитіл імуноглобулінів до хелікобактер пілорі, виділення специфічної ДНК мікроорганізмів, дослідження з високою точністю показує реакцію утворення антитіл на чужорідний агент і присутність його генних структур;
  • наявність генетичного матеріалу можна виявити за аналізом калу на антиген бактерії;
  • дихальний тест дозволяє виявити уреазную активність збудника в шлунку, цей фермент (уреазу) — один з виділених хелікобактер;
  • найбільш точним вважається цитологічний вид дослідження матеріалу зі слизової оболонки шлунка, видобутого при фіброгастродуоденоскопії, тому що він є єдиним, який підтверджується видом самої бактерії під мікроскопом.

Розглянемо переваги і недоліки кожного способу дослідження.

Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати
Найбільш точний аналіз отримують, призначаючи по 2 і більше різних видів діагностики різними методиками

Підтвердження наявності хелікобактерії за аналізом крові

Виявити таку бактерію як хелікобактер пілорі в крові неможливо, тому що вона туди не потрапляє. Місце проживання обмежується шлунком, кишечником, занесенням в ротову порожнину, в слину. Специфічна імунна реакція утворюється у відповідь на впровадження патогенного мікроба. В крові з’являються антитіла і імуноглобуліни.

Антитіла виявляють методом імуноферментного аналізу (ІФА) з титрів. Ще більш достовірним результатом є визначення кількості імуноглобулінів, що беруть участь у формуванні імунітету.

Типи імуноглобулінів IgG, IgM і IgA вказують на включення в захисну реакцію антитіл різного виду і мають окреме діагностичне значення.

Для дослідження беруть венозну кров. Спеціальною речовиною осаджують клітинні елементи і плазму отримують. Невелика кількість розноситься по осередках планшета, в які попередньо внесені стандартні антигени.

Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати
Якщо в крові людини є антитіла, то на дні комірок відбувається не видима оком реакція

Результат підтверджується внесенням фарби і різною інтенсивністю фарбування лунок. Кількісно врахувати результат можна за допомогою спектрофотометрического способу. Висновок видається у цифровому значенні. Норми антитіл до хелікобактер пілорі в титрах виражаються в одиницях виміру та визначені до кожного типу імуноглобулінів.

Недолік методу полягає в можливості і законах спрацьовування імунної системи. Слід пам’ятати, що:

  • антитіла з’являються не відразу, їм необхідний певний строк для освіти (для імуноглобулінів типу М — майже місяць);
  • реакція також означає зустріч раніше з патогенним мікроорганізмом, перенесену хворобу, після чого довгостроково залишаються антитіла (у літніх людей довічно);
  • порушення імунітету у пацієнта відображається на достовірності результатів аналізу.

Метод дає позитивні і хибно-негативні відповіді. Єдина можливість підвищення діагностичного значення аналізу на хелікобактер пілорі — вивчення кожного типу імуноглобулінів окремо і разом.

Розшифровка результатів аналізу крові

Особливістю складу імуноглобулінів є:

  • IgG — найпоширеніший тип, на нього припадає до 75% всього складу імуноглобулінів, виробляється через 3-4 тижні після «зустрічі» з антигеном, зберігається від місяця до півтора років після ефективного лікування, у деяких людей довічно;
  • IgA та ІдМ — найбільш великі білкові комплекси, але на них припадає лише 10% усіх типів, виробляються швидко, IgA до хелікобактер пілорі можна також виявити в слині пацієнта, вмісті шлунка;
  • тип А показує наскільки висока активність запальної реакції.

Спосіб полімеразної ланцюгової реакції

Метод потребує дорогому обладнанні, тому використовується не у всіх медичних установах. Суть — не просто виявлення антитіл та імуноглобулінів, а ДНК самої бактерії (речовини, що визначає генетичну структуру). Спосіб настільки точний, що дозволяє виявити єдину бактерію.

Аналіз заснований на багаторазовому подвоєння потрібного фрагмента ДНК (до 30-40 копій) за заданими параметрами. Ланцюжок копіювання створює достатню кількість матеріалу для дослідження. Частіше використовується при діагностичних складнощі, розбіжності у трактуванні результатів.

Висновки:

  • діагностика хелікобактер пілорі за аналізом крові повинна проводитися з урахуванням передбачуваної завдання виявити наявність продуктів впливу бактерії, встановити активність запального процесу, бактеріоносійство, підтвердити лікування після курсу терапії);
  • тип імуноглобулінів вказує на ранню захисну реакцію, наслідки перенесеного запалення;
  • слід враховувати можливість помилкових та сумнівних результатів;
  • для отримання більш точних даних необхідна комплексна оцінка всіх аналізів.

Як виявляється хелікобактер пілорі в калових масах?

Брати для аналізу калові маси — зручний варіант обстеження пацієнтів дитячого віку, літніх людей. Спосіб не потребує присутності самого хворого. Слід враховувати особливості існування хелікобактерій в кале. Середовище кишечника:

  • не має необхідної кислотності;
  • збіднена киснем;
  • піддається впливу сильних ферментних систем жовчі і соку підшлункової залози.

Ці фактори несприятливі для виживання хелікобактер. Але мікроорганізм здатний пристосовуватися, і утворює кулясту (коковую) форму, покриту захисною оболонкою.
Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати
У кількісному відношенні число бактерій в кишечнику значно знижується

Для виявлення ознак, що вказують на бактерією хелікобактер, найбільш придатний метод полімеразної ланцюгової реакції. Суть вже описана вище. Створення ланцюга з копій дозволяє збільшити число визначених ділянок ДНК і зафіксувати участь збудника в причини захворювання пацієнта з точністю до 95%.

Матеріалом для дослідження можуть бути крім крові і калу:

  • слина;
  • сеча;
  • откашливаемая мокротиння;
  • у вагітних навколоплідні води.

Після курсу спеціального антибактеріального лікування метод довго буде давати позитивні результати у зв’язку з відходженням зруйнованих частинок мікроорганізмів.

Уреазний дихальний тест

Аналіз на хелікобактер пілорі методом уреазного тесту пов’язаний із синтезом бактерією ферменту уреази. Саме вона дає можливість мікроорганізму існувати в шлунковому соку, що розщеплює сечовину до рівня аміаку і вуглекислого газу, що видихається через легені. Методика має 3 модифікації:

  • з сечовиною, меченной ізотопами радіоактивного вуглецю;
  • 13С – уреазний тест;
  • хелик-тест.

Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати
Сучасні тест-системи оснащені спеціальним захистом дихальної трубки від слини

Варіант з ізотопами сечовини — спочатку дослідження пацієнт просто дихає в трубку, у нього беруть дві повітряні проби. Через 15 хвилин після прийому всередину розчину міченої сечовини забираються ще 4 проби. При диханні важливо своєчасно глитати накопичилася слину, при попаданні в проби вона псує результати і тест доводиться повторювати.

Уреазний тест 13С — найбільш поширений в гастроентерологічної діагностиці. В даному варіанті використовують нерадиоактивную сечовину, меченую ізотопом 13С. Пацієнтові доводиться здати тільки 2 проби повітря, що видихається в спеціальні пакети: першу натщесерце вранці, другу — через 30 хвилин після прийому діагностичного розчину.

Перевагами способу є:

  • точна діагностика;
  • безпека при відсутності використання радіоактивних матеріалів;
  • тривалість дослідження в межах 40 хвилин, що зручно для пацієнта.

Дихальний хелик-тест — модифікації застосовується карбамід. Відрізняється великим надходженням виділеного газу після прийому карбамідної суміші. Порівнюється утримання в початковій пробі повітря і після впливу карбаміду.

Тест вважається безпечним, пропонується для використання в діагностиці дітям і вагітним жінкам. Але фахівці не підтверджують його достатню точність, тому використовують рідко. У висновку після проведення уреазного тесту буде вказана активність:

  • якщо виявлена — позитивний результат;
  • якщо ні — негативний.

Кількісно показники визначають спеціальним апаратом (мас-спектрометром). Прийнято давати оцінку аналізу на хелікобактер залежно від рівня ізотопу або його замінника видихається повітряної суміші:

  • легким ступенем обсіменіння вважається 1-3,4%;
  • середній — 3,5–6,4;
  • важкою — 6,5–9,4;
  • вкрай важкою — будь-які показники понад 9,5%.

Важливо пам’ятати, що уреазний дихальний тест здатний видати псевдонегативний результат, якщо напередодні пацієнт приймав препарати, що знижують секреторну діяльність залоз шлунка. Ці препарати блокують дію уреази бактерії, тоді сечовина перестає розщеплюватися.

Як проводиться уреазний експрес-тест?

Визначити хелікобактер можна по активності уреази не тільки в повітрі, але і безпосередньо в отриманому при фіброгастроскопії шматочку тканини слизової шлунка. Його засівають на спеціальне середовище, яка в разі наявності уреази і виділення аміаку починає ощелачиваться. Застосування жовтого індикатора супроводжується заміною на малинове забарвлення.

Оцінка проводиться за кількістю плюсів (+) в залежності від часу, необхідного для зміни кольору:

  • + — знадобилося не менше 24 годин (інфікування незначне);
  • ++ — процес тривав до трьох годин (поширеність помірна);
  • +++ — колір змінився за годину (інфікування значне).

Метод біопсії з цитологічним дослідженням

Найбільш точним способом виявлення є дослідження цитологічного матеріалу у вигляді мазків слизу, отриманого при фіброгастродуоденоскопії. Практично виключена можливість помилкових результатів. Складності залежать тільки від підготовки і досвіду персоналу.

Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати
Бактерії під мікроскопом має дуже характерний зовнішній вигляд з джгутиками
Негативний результат оцінюється, як норма бактерії (не виявлено), позитивним вважається виявлення навіть одиничних бактерій.

Для кількісної оцінки використовують позначення обсіменіння плюсами або кількість мікроорганізмів у полі зору:

  • (+) або слабка — відзначається при виявленні до 20 бактерій у полі зору мікроскопа;
  • (++) або помірна — 20-40 мікроорганізмів;
  • (+++) висока — понад 40 бактерій.

Потрібна підготовка перед здачею аналізу?

Де можна здати аналіз на хелікобактер підкаже лікар при направленні пацієнта. Існуючі методи часто вимагають участі спеціальної технічної бази та підготовки фахівців, яких немає в поліклінічній мережі. Тому доводиться користуватися послугами приватних клінік. Важливо дотримуватися правила як здавати аналіз на хелікобактер пілорі. Можливі особливості при різних методиках.

Способи виявлення антитіл, імуноглобулінів вимагають:

  • виключення з раціону за 24 години до здачі крові жирної їжі, алкоголю;
  • припинення прийому лікарських засобів (антибіотиків, нестероїдних протизапальних препаратів, гормонів) за 14 днів;
  • обмеження фізичної роботи;
  • забору крові натщесерце.

При здачі калу слід врахувати:

  • наявність інших домішок при захворюваннях кишечника (слиз, гній, кров);
  • вважається непридатним матеріал, що містить сечу;
  • не проводити лікування антибіотиками і Метронідазолом до отримання результатів;
  • заборона проносних засобів в таблетках, розчині або ректальних свічках;
  • за три дні виключити з харчування харчову клітковину, солоні продукти.

Якщо призначено аналіз на дихальну уреазу будь-яким методом необхідно:

  • увечері легко повечеряти і не є до здачі аналізу;
  • за годину забороняється пити воду;
  • у попередні 2 дні дотримуватися дієти з виключенням чорного хліба, бобових, капусти, яблук (викликають підвищений кишкова газоутворення);
  • не можна вживати будь-який алкоголь, оскільки навіть легкі пари алкоголю в повітрі спотворюють результати тесту;
  • для скорочення виділення слини потрібно відмова від куріння;
  • не рекомендується користуватися ополіскувачами і освіжувачами порожнини рота, достатньо почистити зуби звичайною пастою;
  • за 2 тижні припиняється прийом препаратів, що знижують кислотність шлункового соку;
  • антибактеріальні засоби і нестероїдні препарати слід відмінити за тиждень.

Аналіз на хелікобактер пілорі: норма, як здавати, діагностика, результати
Для зниження утворення слини доведеться на деякий час відмовитися від жувальної гумки

Кому необхідно пройти обстеження?

Аналіз на виявлення хелікобактер в організмі призначається за такими показаннями:

  • якщо людина часто відчуває дискомфорт в кишечнику у вигляді незрозумілих болів, підвищеного газоутворення, бурчання, схильності до проносів або запору, непереносимості якоїсь їжі;
  • на тлі повного здоров’я, але при наявності хворого людини в сім’ї для виявлення бактеріоносійства, навіть мінімальне число бактерій в умовах зниженого імунітету здатне викликати дуже швидко важке ураження шлунка;
  • не можна залишати без уваги такий ознака, як швидке сп’яніння від незначних доз алкоголю з вираженим похміллям, хелікобактерії порушують процеси переробки їжі, дія ферментів по засвоєнню спирту;
  • при незрозумілих болях в області епігастрію, відчуття важкості, печії;
  • погіршення самопочуття після прийому жирної і смаженої їжі, гострих страв;
  • у пацієнта з’являються напади нудоти і блювоти.

Кількісне підтвердження обсіменіння шлунка хелікобактер необхідно:

  • для вибору методики лікування гастриту, виразкової хвороби;
  • виявлення зараження в післяопераційному періоді у пацієнтів з видаленою пухлиною шлунка, лімфомою;
  • контролю ефективності цільового застосування лікарських засобів.

З дати відкриття хелікобактерії минуло вже понад 140 років. Сучасні вчені працюють над пропозиціями щодо достовірним експрес-тестів. Життя вимагає швидкого впровадження методу обстеження на рівні поліклініки.