Аналіз на сальмонельоз: лабораторна діагностика, як здавати, навіщо беруть мазок

Зміст

• Що відомо про збудників сальмонельозу?
• Характеристика збудника
• Які властивості визначають здатність сальмонел заражати людини?
• Які антигенні властивості сальмонел використовуються в діагностичних цілях?
• Культуральні властивості сальмонел та їх значення в бак. діагностиці
• Як лабораторним способом виявляють шляхи зараження?
• Епідеміологічна діагностика
• Клінічна діагностика сальмонельозу
• Диференціальна діагностика

Сальмонельози — не одна, а група гострих захворювань, які найчастіше проявляються ураженням органів травлення. Хворіють не тільки люди, але і птахи, тварини. За госпітальної статистикою на сальмонельози припадає більше половини випадків всіх інфекційних захворювань.

Хвороба найчастіше реєструється як спалах в родопомічному закладі, в дитячих садах, таборах відпочинку. Діти — найбільш чутливий до зараження контингент, особливо грудного віку.

Тому аналіз на сальмонельоз включений в перелік обов’язкових оглядів людей, які оформляються на роботу в установи, що пов’язані з обслуговуванням дітей, харчоблоки. Своєчасно виявити захворювання у носіїв необхідно для запобігання його поширення.

Інший небезпечний контингент — люди зі зниженим імунітетом. Їх найбільше число знаходиться на лікуванні в лікарнях різного профілю. Зараження людини в умовах стаціонару відрізняється від інших випадків високою стійкістю збудника інфекції до лікарських препаратів і складним лікуванням.

Що відомо про збудників сальмонельозу?

В 1880 році вперше виділена сальмонела у хворого на черевний тиф. Подальше вивчення дозволило виявити майже аналогічні бактерії у свиней, курей, інших тварин. Виявилося, що збудники сальмонельозу найчастіше знаходять у пацієнтів з клінічною картиною гострого отруєння або гастроентериту.

Дані сучасних мікробіологічних досліджень дозволяють розділити клас сальмонел на два види та виділити 7 підтипів. Раніше вважалося, що їх значно більше, але імунологічним вивченням збудників доведена численна різновид, пов’язана з антигенним складом (до 2500).

Діагноз сальмонельозу ставиться після виявлення конкретної причини у хворого. Для людини основним вражаючим видом є підвид Еnterica. Він виявлений у 99% хворих. Підтип сальмонели Typhimurium — здатний викликати важке поширене (генералізований) ураження з наявністю збудника в крові.

Рідко виявляються такі варіанти, як:

• Choleraesuis,
• Heidelberg,
• Derby,
• Anatum.

Характеристика збудника

Сальмонели мають вигляд паличок, по відношенню до фарбування Грам-негативні. Добре рухаються. Здатні утворити захисну капсулу з полісахаридів. Відносяться до факультативних (умовним) анаеробів, тобто здатні жити як у кисневому середовищі, так і без нього. Енергію отримують в результаті окисно-відновних реакцій сполук, видобутих з організму носія.

Сальмонели забезпечені безліччю пілей (ворсинки на поверхні) і джгутиками

Біохімічні властивості покладені в основу створення поживних середовищ. Сальмонели здатні розщеплювати багато вуглеводи (крім лактози, сахарози), включаючи глюкозу, мальтозу, арабінозу, і утворювати при цьому кислоту і газ.

Окремі типи мають відмінні властивості, що також використовується в мікробіологічній діагностиці. Наприклад, Тур?і не утворює газ, а Paratyphi A не виділяє індол. Всі сальмонели розщеплюють білок до сірководню. Не мають ферменту оксидази, містять каталазу.

Сальмонели відрізняються живучістю і збереженням зараження :

• в річках і відкритих водоймах — 120 діб;
• солоній морській воді — місяць;
• землі до 9 місяців;
• пилу домашнього походження — до 1,5 років;
• ковбаси і м’ясних виробах — від 2 до 4 місяців;
• при заморожуванні м’яса — 12 місяців;
• яйця — 1 рік;
• в шкаралупі — майже місяць.

Сальмонели використовують такі продукти, як молоко, сир, сметану, фарш в якості поживного середовища, де активно розмножуються.

Бактерії особливо чутливі до нагрівання, кип’ятіння, дії хлоромістких дезінфікуючих засобів.

Які властивості визначають здатність сальмонел заражати людини?

Ступінь зараження визначається факторами вірулентності сальмонел. До них відносяться:

• синтез особливих білків, які сприяють проникненню збудника всередину епітеліальних клітин кишечника і забезпечують виживання;
• стимуляція сальмонелами цитокінів і хемокінів до запальної реакції;
• руйнування макрофагів крові людини;
• розмноження всередині макрофагів з виділенням ендотоксинів;
• дію ендотоксинів сприяє ураження судин і нервових закінчень кишківника, підвищує проникність клітин;
• стимуляція виділення хлоридів і вираженої діареї.

Які антигенні властивості сальмонел використовуються в діагностичних цілях?

Імунна діагностика сальмонельозу має багаті можливості завдяки наявності у збудника виражених антигенних властивостей. За ним можна типувати вид сальмонели. Розрізняють 3 основних антигену:

• Про-антиген — витримує тривале кип’ятіння (2,5 години), має властивості ендотоксину;
• Н-антиген — знаходиться в джгутиках, руйнується при нагріванні вище 75 градусів, складається з білка флагеллина. Істотною відмінною ознакою від інших ентеробактерій є здатність виділяти по фазах обидва антигену.
• К-антиген міститься в капсулі.

Vi-антиген характерний тільки для збудників тифу і паратифу. По антигенній переважаючою структурі Ф. Кауфман та П. Уайт у 2001 році запропонували класифікацію сальмонел, яка використовується і понині.

Для проведення імунних тестів сальмонельозу у пацієнта, контактного людини беруть аналіз крові або сечі

Серологічне дослідження вважається досить трудомістким, тому використовується рідко у вигляді реакції гемаглютинації, за допомогою еритроцитарних діагностикумів. Визначається не тільки наявність антитіл, але і їх титр. Для аналізу достатньо 1-2 мл крові. Її розводять ізотонічним розчином і додають діагностикум з О-антигеном.

Має значення результат при визначенні антитіл в розведенні 1/100 і зростання титру в динамічних дослідженнях майже в 4 рази.Більш чутливою вважається реакція непрямої гемаглютинації.

Можливі негативні результати:

• у випадках легких форм хвороби;
• навпаки, при тяжкому перебігу сальмонельозу, у новонароджених і немовлят.

Якщо беруть аналіз на сальмонельоз з калу або сечі, то використовуються реакції коагглютинации та імуноферментний метод.

За допомогою ІФА можна досліджувати титр антитіл в крові, окремо підрахувати його для специфічних антитіл. Наявність високого показника М-імуноглобулінів завжди вказує на активний інфекційний процес.

Спосіб імуноферментного аналізу (ІФА) проводять у спеціальних лабораторіях з контролю за епідеміологічною ситуацією. Вони являють епідеміологам свої дані про виявлення нового підтипу збудника.

Де здати кров на імунологічний аналіз на конкретній території підкаже лікар інфекціоніст або епідеміолог. Приватні лабораторії типу «Інвітро» проводять аналіз за бажанням відвідувача.

Аналіз також проводиться при одужання пацієнта від сальмонельозу з допомогою парних сироваток з інтервалом у тиждень. При цьому особливо важливо виявити бактеріоносійство:

• гостре — три місяці після захворювання;
• хронічне — більше трьох місяців;
• транзиторне — одно-, дворазовий позитивний висів сальмонел з калу без симптоматики та виявлення антитіл.

Культуральні властивості сальмонел та їх значення в бак. діагностиці

Лабораторна діагностика сальмонельозу ґрунтується на бактеріологічному способі дослідження калу. Він набагато доступніше і досить інформативний. Проводиться в епідеміологічних лабораторіях за направленням лікаря.

Враховуються здатності збудника:

• рости на простих живильних середовищах при температурі 8-45 градусів;
• утворювати рівномірне помутніння в рідкому середовищі;
• давати прозорі безбарвні колонії на м’ясопептонному агарі.

Існують селективні середовища. Так називають додавання специфічних речовин, при яких виживають тільки колонії сальмонел. До них відносяться будь-середовища з жовчю, селенитовый бульйон, вісмут-сульфіт-агар. Диференційно-діагностичними середовищами вважаються лактозосодержащие варіанти: Ендо, Левіна, Макконкі. Колонії виростають безбарвними, оскільки сальмонели здатні розщеплювати лактозу.

Для посіву петлею береться зразок матеріалу і розмазується на чашці Петрі, що містить живильне середовище

Сальмонели можна виявити у фекаліях, блювотних масах, сечі, промивних водах з шлунка, крові і спинномозковій рідині. Оптимальним вважається посів крові протягом періоду підвищення температури. З ліктьової вени достатньо взяти близько 7 мл крові, провести засів у жовчний бульйон або на середу Рапопорта.

Бак аналіз включає обов’язкове дослідження біохімічних властивостей збудника, вивчення будови під мікроскопом. При визначенні тривалості дослідження доводиться враховувати не тільки роботу лаборантів, але і скільки часу займає ріст колоній.

Зазвичай результат видається через тиждень. Позитивні дані отримують при бак дослідженні у 40-80% пацієнтів з симптомами сальмонельозу. Максимальна висеваемость припадає на перші 7 днів захворювання.

При епідеміологічному розслідуванні спалаху сальмонельозу за вказівкою лікаря для аналізу беруться:

• залишки приготовлених страв;
• продукти, що використовуються у кулінарній обробці;
• змиви з кухонного обладнання, тарілок;
• при виявленні зараження в медичному закладі — змиви з рук персоналу, обладнання.

Кожен випадок враховує дотримання технології приготування їжі, санітарну обробку і стан об’єкта.

На вісмут-сульфіт-агарі утворюються характерні чорні блискучі колонії

Як лабораторним способом виявляють шляхи зараження?

Для визначення кому і як здавати аналіз на сальмонельоз враховуються можливі джерела збудника. Хвора людина з легкою формою або носій — виявляється при обстеженні всього персоналу, кола контактних осіб взяттям мазка калу на дизгруппу.

У дослідження включені найбільш поширені інфекційні захворювання, які проявляються однаковою клінічною картиною (пронос, температура, болі в животі, блювота):

• дизентерія,
• сальмонельоз,
• амебіаз,
• ротавірусна інфекція.

Забір матеріалу проводиться з анального отвору тільки під контролем медичного працівника в інфекційному кабінеті стерильної тонкої ватною паличкою. У випадку виявлення сальмонел або інших інфекційних агентів співробітника усувають від роботи на термін лікування та отримання контрольних негативних результатів.

Домашні птахи (кури, качки, індики) — є джерелом зараження людини в половині випадків. Сальмонели знаходяться всередині кишечника або в крові птаха, проникають крізь шкаралупу яєць мчать особин. Зараження відбувається при вживанні неварених яєць. Недостатній температурі кулінарної обробки.

Деякі мами практикують приготування для дітей напою зі збитих сирих яєць з цукром і молоком, забуваючи про сальмонельоз

Домашні тварини (кішки, собаки, хом’яки, миші), а також худоба свині, корови) можуть бути носіями інфекції. Вони передають сальмонел через забруднену фекаліями, слиною, сечею зовнішнє середовище. Дітям дістається збудник з брудними руками. До 20% випадків зараження залежать від вживання свинини, яловичини.

Дуже рідкісним джерелом вважається риба, молюски, раки, краби.

М’ясо може заразити хвора людина в процесі транспортування, зберігання, переробки.

Епідеміологічна діагностика

Діагностика сальмонельозу враховує:

• клінічний перебіг та особливості симптоматики;
• уточнення поширеності вогнища;
• обстеження контактних осіб;
• виявлення порушення санітарних норм;
• дослідження продуктів харчування.

Особливу небезпеку представляють групові випадки захворювання в рід. будинках, психіатричних стаціонарах, будинках престарілих та інвалідів. Сальмонельоз може призвести до переривання вагітності у майбутньої матері, смертельного результату немовлят.

Санітарній службі надані широкі права щодо проведення розслідування для виявлення джерел інфекції і якнайшвидшої локалізації розповсюдження

Приймаються рішення про тимчасове закриття торгових точок, стаціонарів або пере профілізації в інфекційне відділення, обробці приміщень дезінфікуючими рідинами. Винуватців карають адміністративними заходами, штрафами. Від того, наскільки швидко зроблять свою роботу епідеміологи залежить недопущення розповсюдження інфекції на території.

Клінічна діагностика сальмонельозу

Клінічна діагностика сальмонельозу заснована на врахуванні специфічних симптомів і відмінних ознак з іншими схожими захворюваннями.

До типовим ознаками сальмонельозу відносяться прояви гострого ураження шлунку і кишечника:

• початок раптовий, тяжкість швидко наростає;
• підвищення температури, озноб;
• блювота з’їденою їжею і жовчю у перші години захворювання;
• головний біль;
• максимальна болючість в епігастрії при гастритической формі, по ходу кишечника при гастроентерітіческом течії, у правій клубової області у разі гастроентероколіту;
• язик сухий, обкладений густим нальотом;
• скупчення газу і бурчання в кишечнику;
• пронос з зеленуватими фекаліями і смердючим запахом, домішками слизу і крові.

Для дітей до року характерні зневоднення організму, збільшення печінки і селезінки, сонливість, млявість через токсичного впливу на мозок, можливі судоми.

Яскрава клінічна картинка починається із звичайного відчуття слабкості

В аналізі крові спостерігається значний лейкоцитоз зі зрушенням формули вліво, збільшення ШОЕ. У більшості випадків на цій стадії інфекційний процес може завершитися.

Тяжкий перебіг (тіфоподобное) спостерігається при попаданні збудника сальмонельозу в кров’яне русло, супроводжується септичним станом, вираженою інтоксикацією, розеолезной висипом. Сальмонели при цьому здатні викликати дистрофію в селезінці і печінці, сформувати вторинного вогнища гнійного запалення по всьому тілу.

Диференціальна діагностика

Ознаки сальмонельозу важливо відрізнити від дуже схожих симптомів дизентерії, холери, гострого апендициту, тромбозу мезентеріальних судин, отруєння миш’яком і отруйними грибами.

Для дизентерії більш характерні тенезми (помилкові позиви до дефекації), убогий стілець з слизу з кров’ю, спазм сигмовидної кишки, що визначається пальпаторно в клубової області зліва, рідкісна блювання.

Холера проявляється:

• водянистим стільцем без запаху, з виглядом «рисового відвару»;
• відсутністю болю в животі і болючості при дефекації;
• багаторазовою блювотою, яка проявляється пізніше проносу;
• нормальною або зниженою температурою тіла;
• відсутністю ознобом;
• вираженими ознаками дегідратації.

До ознаками гострого апендициту відносяться:

• біль починається в епігастрії і переходить в клубову область праворуч;
• за характером біль постійна, не зменшується після проносу, посилюється при кашлі;
• наявність симптомів подразнення очеревини;
• частіше запор, якщо понос, то 3-4 рази без домішок;
• блювання не завжди, 1-2 рази на початку захворювання;
• у крові виражений лейкоцитоз, при спостереженні посилюється.

Для тромбозу мезентеріальних судин необхідно наступні поєднання ознак:

• літній вік пацієнта;
• наявність вираженого атеросклерозу судин;
• прояви ішемії судячи по клінічній картині болю в серці і на ЕКГ;
• на відміну від сальмонельозу біль нестерпна по інтенсивності;
• відсутність певної локалізації болю;
• рідкий стілець без запаху з домішкою крові;
• здуття живота;
• немає ознак зневоднення;
• наростає лейкоцитоз в крові.

При сальмонельозі блювота з’являється одним з початкових симптомів

При отруєнні миш’яком спостерігаються:

• головні і м’язові болі;
• судомний синдром;
• блювота носить завзятий характер, відчувається запах часнику;
• у рідкому стільці багато слизу;
• біль у животі без чіткої локалізації;
• сухість, печіння у роті;
• металевий присмак;
• набряклість особи;
• виражений кон’юнктивіт;
• можливі парези і паралічі.

Для отруєнь грибами на відміну від сальмонельозу характерні:

• зв’язок з прийомом в їжу грибних страв (перед проявом симптомів може пройти від одного до трьох годин);
• бурхливий початок відразу всіх ознак;
• болі в животі за типом сильних переймоподібних кольок;
• нудота, блювання, бліда поганка викликає неприборкану блювоту;
• слинотеча;
• стілець водянистий з кров’ю;
• сильний головний біль, слабкість через інтоксикації;
• запаморочення, падіння артеріального тиску;
• розлади психіки з галюцинаціями, маренням, сопорозним станом;
• жовтушність шкіри.

Таке різноманіття симптоматики сальмонеллезной інфекції сприяє співчуттю в процесі діагностики лікарів різних спеціальностей. Схожість ознак часто вимагає консультації хірурга, кардіолога, у жінок — гінеколога. При цих захворюваннях важливим аргументом на користь сальмонельозу служать позитивні результати посіву, серологічних та імунних тестів.