Гастрит        28 Лютого 2018        207         0

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні

Зміст

  • Трохи статистики
  • Характеристика вірусу і відповідних змін у крові хворого
  • Кому необхідно провести обстеження на гепатит?
  • Як визначити гепатит імунологічними методами?
  • Спосіб полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР)
  • Експрес-способи
  • Непрямі методи виявлення гепатиту
  • Вірусний гепатит А
  • Вірусний гепатит B
  • Хронічний гепатит C
  • Хронічний гепатит D
  • Якими підтверджується аналізами токсичний гепатит?
  • Чи потрібно готуватися до здачі аналізів на гепатит?

Гепатит — захворювання печінки запального характеру. Воно викликається вірусами або речовинами з токсичною дією. Хвороба вимикає частину функцій печінки, що навіть тимчасово небезпечно для організму людини. Хронічне протягом призводить до цирозу з печінковою недостатністю, ракової пухлини. От чому своєчасне виявлення за допомогою аналізів на гепатит так важливо для призначення лікування пацієнта та заходів профілактики оточуючим.

Трохи статистики

Захворюваність гепатитом щорічно в усьому світі збільшується на 20-50%. Найбільш поширені гепатит В та С. Четверта частина випадків переходить в невиліковний цироз або рак печінки. 2017 рік відрізняється спалахом гепатиту типу А в Європі.

У Росії захворюваність типом А виросла в 2 рази порівняно з 2016 роком. Максимальне поширення зазначено в Удмуртії, Іркутської, Пермської і Івановській областях. Росспоживнагляд вважає, що для росіян головною причиною є недостатня вакцинація і низька якість питної води.

Характеристика вірусу і відповідних змін у крові хворого

Збудником гепатиту є вірус, який неможливо виявити у звичайній лабораторії. У спеціалізованих вірусологічних установах вивчені його властивості. Мікроорганізм складається з білкової оболонки. Іноді додатково покритий шаром жиру. Всередині клітини знаходиться її геном або матеріал, що забезпечує передачу властивостей при розмноженні і здатність до інфікування.

Він включає ланцюжка ДНК і РНК. Продукти життєдіяльності вірусу (білки, полісахариди, ліпіди) для організму людини є чужорідними. В імунній реакції вони виконують роль антигенів. У відповідь на проникнення вірусу гепатиту в крові відбувається вироблення антитіл. Вони представлені імуноглобулінами:

  • вільно циркулюють по кровоносній системі;
  • пов’язаними з клітинами В-лімфоцитами.

Завдання антитіл — зв’язування, знищення та виведення з організму чужорідних агентів. Крім того, вони забезпечують передачу інформації наступним поколінням клітин про зустрічі з небажаним вторгненням.

Вивчення аналізів крові при гепатиті дозволило виділити віруси з різною генною структурою. До кожного з них, виробляються свої антитіла (маркери гепатитів). Виявилося, що в клінічному перебігу та очікуваний ураженні печінки теж є залежність від генетичного типу вірусу. Так, виділені різновиди вірусного гепатиту, вони названі початковими літерами англійського алфавіту.

Для виявлення присутності вірусу в організмі людини найбільш доступними є імунологічні методики на специфічні імуноглобуліни або антитіла. Їх наявність також вказує на ступінь активності або агресивності інфекції. Навіть щоб побачити вірус гепатиту під електронним мікроскопом у спеціалізованих лабораторіях доводиться попередньо обробляти плазму крові спеціальною сироваткою з антитілами.

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні
Під електронним мікроскопом навколо вірусу розрізняється «віночок» з імунних комплексів, для поліпшення видимості його контрастують розчином фосфорно-вольфрамової кислоти

Розповідаючи про лабораторної діагностики гепатитів, ми розберемо особливості деяких імунологічних видів діагностування гепатитів.

Кому необхідно провести обстеження на гепатит?

Гепатит небезпечний тривалим безсимптомним періодом. Тому обстеження на це захворювання необхідно проводити в першу чергу людям, що контактують з хворими або кров’ю. Звичайно, до цієї групи відносяться медичні працівники, особливо працюючі:

  • в акушерстві;
  • хірургічних відділеннях;
  • процедурних кабінетах;
  • на станціях переливання крові;
  • стоматологічних кабінетах.

До контингентів, зобов’язаним здавати кров на гепатит, також відносяться:

  • вагітні;
  • донори крові та органів для трансплантації;
  • люди з контактного оточення хворого;
  • пацієнти наркологічних та шкірно-венерологічних установ;
  • діти з інтернатів, будинків дитини;
  • люди, яким належить будь-яка планова операція.

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні
Обов’язково обстежуються на гепатит працівники лабораторій, відділень гематології, гемодіалізу

Спеціальною інструкцією визначено захворювання, які потребують диференціальної діагностики з атипично протікають гепатитом:

  • всі хронічні хвороби печінки;
  • туберкульоз;
  • новоутворення.

Обов’язково обстежуються новонароджені у мам, які страждають вірусним гепатитом. Кратність досліджень строго контролюється органами санепіднагляду.

Як визначити гепатит імунологічними методами?

Виявити характерні антигени, складу імуноглобулінів антитіл допомагають аналізи на маркери вірусних гепатитів. Їх визначення проводять:

  • в сироватці крові;
  • калових масах;
  • заражених продуктах;
  • воді;
  • біоптатах печінки.

Склад антигенів в крові при гепатиті залежить від тривалості інкубаційного періоду захворювання, терміну, що пройшов з моменту зараження. Використовуються різні імунологічні методики діагностики. Всі імунологічні методи засновані на виявленні антитіл або антигенних структур з міченим антитілам. Застосовуються різні модифікації.

Імуноферментний аналіз (ІФА) — до сироватці крові пацієнта додаються стандартні антитіла, мічені ферментами. Якщо є антигенні структури вірусу, то відбувається з’єднання антигену з сироватковим білком. Додавання до суміші спеціального барвника змінює його колір пропорційно числу молекул пов’язаного антигену. Таким чином, вдається одержати кількісне відображення реакції.

Вірусне навантаження у результатах досліджень оцінюється в міжнародних одиницях (МО/мл):

  • високою вважається показник — понад 800 МО/мл;
  • низькою — нижче 800.

Імуноблотинг — більш чутливий метод, що поєднує ІФА з електрофорезом. Виявляє антитіла і імуноглобуліни. Спочатку плазму крові пацієнта з передбачуваними антигенами способом електрофорезу в гелевою середовищі поділяють і переносять на спеціальну папір, просочену активує речовиною. Потім наноситься сироватка і проводиться електрофорез.

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні
В арсеналі вірусологічних лабораторій є стандартні смужки з антигенами, залишається тільки нанести на них сироватку з крові пацієнта

В залежності від матеріалу дослідження розрізняють:

  • ДНК-блоттінг;
  • РНК – блоттінг;
  • білок – блоттінг.

Облік тривалості часу скільки робиться аналіз на гепатит методом імуноблотінгу показує коливання від 1-3 годин до 1,5–2 доби в залежності від поставленої задачі дослідження.

Радіоімунологічних аналіз (РІА) — відрізняється від двох попередніх використанням ізотопів для мітки одного зі складових компонентів реакції. Зазвичай ними є антигени. Вони зв’язуються антитілами плазми. Оскільки кількість міченого ізотопу заздалегідь відомо, то є можливість кількісного визначення антитіл шляхом радіометрії проб. Методика високочутлива.

Спосіб полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР)

Діагностичне дослідження є необхідним, оскільки дозволяє виявити навіть незначний вміст ДНК вірусу гепатиту. Заснований на процесі копіювання ділянок ДНК або РНК з генної інформацією та складання ланцюгів. Це допомагає збільшити кількість субстрату для аналізу і провести повне дослідження типу вірусу.

Експрес-способи

Експрес-тести у вигляді смужок, просочених особливою речовиною, що дозволяють провести якісну реакцію на маркери гепатиту по краплі крові з пальця. Вони прості в застосуванні. За відгуками експертів досить надійні для первинної постановки діагнозу, вимагають всього 15 хвилин часу для отримання результату.

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні
Випускаються тестові експрес-системи для швидкого обстеження контингентів

Непрямі методи виявлення гепатиту

Лабораторна діагностика вірусних гепатитів є основою виявлення захворювання. Крім імунологічних тестів, застосовуються:

  • загальний аналіз крові — характерне підвищення ШОЕ, гемоглобіну;
  • аналіз сечі на уробілін — позитивний;
  • печінкові проби для з’ясування функціональних порушень роботи органу;
  • пункційна біопсія печінки з проведенням цитологічного аналізу ділянки печінкової тканини.

Порушення функції печінки відразу проявляється у біохімічних дослідженнях крові. Тому розмірковуючи які аналізи треба здати на гепатит, не варто виключати виявлення метаболічних порушень, змін згортання крові, гормонального складу. Вони побічно вважаються свідками на користь гепатиту.

В аналіз крові на гепатит обов’язково включаються специфічні ферментні проби печінки:

  • на аланиновую і аспарагінову трансферази;
  • лужну фосфатазу;
  • лактатдегидрогиназу;
  • сорбитдегидрогеназу;
  • гаммаглутаминтранспептидазу;
  • гаммаглутамилтрансферазу;
  • фруктозо-1-фосфатальдолазу (Ф-1-ФА).

Останні 2 — вважаються найбільш органоспецифичными для ураження печінки. інші ферменти можуть дати хибний результат, оскільки вони підвищуються і при інших захворюваннях:

  • при інфаркті міокарда;
  • рак печінки;
  • хвороби підшлункової залози;
  • інфекційному мононуклеозі;
  • респіраторних інфекціях;
  • запаленні легенів;
  • гастроентеритах.

Пацієнтам призначається розгорнута коагулограма для контролю за системою згортання крові та ступенем ураження печінкової тканини.

Біохімічні показники крові, що підтверджують функціонування печінки:

  • тимолова проба;
  • склад і співвідношення білків;
  • холестерин, ліпопротеїни, тригліцериди — відображають порушення жирового обміну;
  • білірубін — показник синтезу пігментів і роботи жовчного міхура;
  • протромбіновий індекс, фібриноген, фактори згортання крові.

Зміни біохімічних тестів не відрізняються за тенденції при гепатитах, викликаних різними вірусами:

  • підвищується амінотрансфераза, аланиновая більше, ніж аспарагінова, при одужанні показники знижуються;
  • підвищення Ф-1-ФА говорить про важкості ураження печінкової тканини, цей фермент знижується раніше трансаміназ;
  • в сечі виявляються білірубін і уробілін;
  • тимолова проба зростає в 3-5 разів.

Спостерігається вихід ферментів у кров, прямого і непрямого білірубіну. Знижуються альбуміни, протромбіновий індекс. Підвищений холестерин, тригліцериди.

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні
Біохімічні показники крові вказують на руйнування печінкових клітин, порушення функції органа та зміна всіх видів обміну речовин

Розглянемо діагностику на прикладах найбільш поширених форм гепатитів. Типи E, G і F зустрічаються рідко.

Вірусний гепатит А

Захворювання відрізняється від інших типів способом зараження — тільки фекально-оральним і гострим перебігом. Інкубаційний період триває від двох тижнів до 1,5 місяців. Обстеженню підлягають всі близько контактні люди за цей період. Геном клітини містить не ДНК, а РНК (рибонуклеиновую кислоту). Відповідно здаючи аналіз крові або калу на гепатит, слід очікувати маркерів РНК-структур.

Метод ІФА виявляє характерний антиген вірусу А (HAVAg) в досліджуваному матеріалі. Він виявляється в калі пацієнтів за 7-10 діб до перших клінічних ознак хвороби. Титр антитіл до иммуноглобулину IgM наростає в гостру фазу хвороби навіть при безжовтяничній формі і зникає через 6-8 місяців. Антииммуноглобулины до типу G не мають діагностичного значення. Способом ПЛР виявляється РНК вірусу (HAVRNA).

Вірусний гепатит B

Запалення печінки відразу приймає хронічне протягом. Не медики пишуть «гепатит б». Геном вірусу гепатиту В утворений кільцеподібної ДНК. Передається парентерально (не через їжу, руки забруднені продукти).

Маркери визначаються як специфічним антигеном, так і виробленими антитілами. Імунологічні дослідження виявляють:

  • HBsAg — австралійський антиген, поверхневий, вказує на гострий період хвороби, що залишається після одужання;
  • Anti-HBs — антитіла до австралійського антигену, виявляються при імунітет до вірусу;
  • HBcAg — антиген з ядерної структури виявляється не в крові, а у тканинах печінки;
  • Anti-HBc — антитіла, утворені на ядерний антиген, показують ступінь активності вірусу, наявність антитіл до иммуноглобулину Anti-HBc IgM підтверджує загострення гепатиту, високу заразність крові, а Anti-HBc IgG — більш характерний для сприятливого перебігу;
  • HBeAg — білок у складі ядра вірусу розцінюється як несприятливий ознака, але антитіла до нього Anti-HBe показують зниження активності вірусу.

Спосіб ПЛР виявляє генетичний матеріал, підвищений вміст в тесті говорить про активний процес, загострення, зниження трактується, як ремісія хвороби. Розшифровка аналізу повинна супроводжуватися урахуванням функціональних печінкових проб.

Хронічний гепатит C

Специфічність вірусу гепатиту С полягає в утриманні генної інформації, як і у вірусу гепатиту А, не в ДНК, а в РНК. Це дає йому великі можливості змінюватися (мутувати). Для формування антитіл та їх визначення таку властивість вірусу становить серйозну перешкоду. Тому маркерами є:

  • антииммуноглобулин до типу IgM — підкреслюють гостру фазу захворювання, з’являється при неефективному лікуванні, служить ознакою неблагополуччя;
  • до IgG — підтверджують присутність вірусу, залишаються в крові довічно;
  • HCV-RNA — матеріал геному вірусу, оцінюється за результатами ПЛР, навіть слабоположительный результат підтверджує наявність вірусу в організмі.

ВООЗ рекомендує триразове дослідження методом ПЛР) на РНК вірусу гепатиту С. Аналіз отримав назву тест 321. Експерти вважають, що тільки триразове підтвердження при вірусному навантаженні не менше 60 МО/мл можна вважати достовірною діагностикою навіть при відсутності інших маркерів.

Хронічний гепатит D

Особливість вірусу гепатиту D — відсутність самостійності. Він повністю залежить від наявності в організмі вірусу гепатиту B. Але по клінічному перебігу і заразність він вважається найбільш важким. Геном складається з ланцюжка РНК, тому вірус також мутує як при гепатиті С.

Маркерами обов’язково служать:

  • перераховані вище комплекси гепатиту В;
  • специфічний антиген HDAg;
  • генетичний матеріал HDV-RNA;
  • антииммуноглобулины IgM і IgG.

Аналіз крові на гепатит: маркери вірусу, здається чи натщесерце чи ні
Мутація відбувається за рахунок заміни різних ділянок нестійкою ланцюжка РНК

Якими підтверджується аналізами токсичний гепатит?

Ушкоджувальними факторами при токсичному впливі на печінку можуть бути отруйні речовини рослинного і штучного походження:

  • неїстівні гриби;
  • отруйні трави, ягоди;
  • виробничі шкідливості (свинець, ртуть, солі важких металів);
  • добрива;
  • лікарські препарати.

Виявити токсичний характер гепатиту складно. Доводиться виключати всі види вірусних гепатитів, враховувати анамнез захворювання. Факт запалення і пошкодження печінкових клітин підтверджується біохімічними пробами. Пацієнтам призначається розгорнута коагулограма для контролю за системою згортання крові та ступенем ураження печінкової тканини.

Лікарі рекомендують обов’язково здати аналіз на гепатит вірусної етіології з виділенням маркерів. Наявність токсинів у крові та сечі виявляється спеціальним токсикологічним дослідженням.

Чи потрібно готуватися до здачі аналізів на гепатит?

Здаючи кров на гепатит натщесерце чи ні, людина може вплинути на результати дослідження. Адже лікар призначить неправильне лікування, використовуючи неправдиву інформацію. Підготовка включає обов’язкове дотримання кількох умов:

  • на 2 тижні перед здачею аналізів необхідно припинити прийом будь-яких медикаментів;
  • не можна проводити фізіопроцедури, УЗД, рентгенівське дослідження;
  • перед днем здачі аналізів необхідно не займатися інтенсивною фізичною роботою і добре виспатися;
  • у дієті слід виключити овочі і фрукти, що містять каротин (морква, всі плоди і ягоди жовтого кольору), алкоголь, солону, жирну і гостру їжу;
  • на кілька днів доведеться припинити куріння;
  • жінки не повинні здавати аналіз на тлі місячних;
  • кров береться натщесерце вранці, не можна їсти за 10-12 годин до цього моменту.

Отримуючи направлення в лабораторію, потрібно попередити лікаря про супутніх захворюваннях, підвищеній чутливості до лікарських препаратів.

Заздалегідь потрібно дізнатися, скільки днів робиться рекомендований аналіз. Різні методики займають від декількох годин до 10 днів. Складності в діагностиці вимагають очікування результату. Швидше можна зробити аналіз в спеціалізованих установах і приватних клініках, але це обійдеться недешево. Повне обстеження дозволяє призначити оптимальну терапію і контролювати хід лікування.